Injectio
Gentamicini
Thuèc tiªm gentamicin lµ dung
dÞch v« khuÈn chøa gentamicin sulfat trong níc cÊt pha tiªm.
ChÕ phÈm ph¶i ®¸p øng c¸c yªu
cÇu trong chuyªn luËn“Thuèc tiªm, thuèc tiªm truyÒn” (Phô lôc 1.19) vµ c¸c yªu
cÇu sau:
Hµm
lîng gentamicin, tõ 95,0 ®Õn 110,0% so víi hµm
lîng ghi trªn nh·n.
Dung dÞch trong, kh«ng mµu.
PH
3,0 ®Õn 5,5 (Phô lôc 6.2).
§Þnh tÝnh
A. Ph¬ng ph¸p s¾c ký líp
máng (Phô lôc 5.4).
B¶n máng: Silica gel G.
Dung m«i: Sau khi l¾c ®Òu vµ ®Ó t¸ch
líp, lÊy líp díi cña hçn hîp ®ång thÓ tÝch amoniac
13,5 M - cloroform - methanol.
Dung dÞch
®èi chiÕu: Hoµ tan 10 mg gentamicin sulfat chuÈn trong 10 ml níc.
Dung dÞch
thö: Pha
lo·ng chÕ phÈm víi níc ®Ó ®îc dung
dÞch chøa kho¶ng 1 mg gentamicin sulfat trong 1 ml.
C¸ch tiÓn
hµnh: ChÊm
riªng biÖt 20 ml mçi dung dÞch trªn lªn b¶n máng. Sau khi triÓn
khai dung m«i ®i ®îc kho¶ng 15 cm, lÊy ra ®Ó kh« ngoµi kh«ng khÝ. Ph¸t hiÖn
trong h¬i iod hoÆc phun dung dÞch ninhydrin trong ethanol (TT) vµ sÊy b¶n máng ë 105 oC
trong 5 phót: Ba vÕt chÝnh thu ®îc trªn s¾c ký ®å cña dung dÞch thö ph¶i cã
cïng gi¸ trÞ Rf vµ mµu s¾c víi ba vÕt chÝnh thu ®îc trªn s¾c ký ®å
cña dung dÞch ®èi chiÕu.
B. Trong phÐp thö thµnh phÇn cña gentamicin
sulfat, thêi gian lu cña 4 pic chÝnh trªn s¾c ký ®å trong dung dÞch thö ph¶i
t¬ng ®¬ng víi thêi gian lu cña 4 pic chÝnh trªn s¾c ký ®å trong dung dÞch
®èi chiÕu.
Thµnh phÇn cña gentamicin sulfat.
TiÕn
hµnh b»ng ph¬ng ph¸p s¾c ký láng (Phô lôc 5.3).
Pha ®éng: Pha dung dÞch
natri heptansulphonat monohydrat 0,025 M trong hçn hîp: Methanol - níc - acid
acetic b¨ng (70: 25: 5), läc qua mµng läc 0,45 mm.
Dung dÞch ®èi chiÕu: Thªm 5 ml methanol
(TT) vµo 10 ml dung dÞch gentamicin
sulfat chuÈn cã nång ®é 0,065%, l¾c ®Òu vµ thªm 4 ml thuèc thö phthalaldehyd (TT), l¾c ®Òu vµ thªm methanol (TT) võa ®ñ 25
ml. §un trong c¸ch thuû ë 60 oC, trong 15 phót, ®Ó nguéi. NÕu dung
dÞch kh«ng dïng ngay, ®Ó l¹nh ë 0 oC vµ sö dông trong vßng 4 giê.
Dung dÞch thö: Còng chuÈn bÞ
§iÒu kiÖn s¾c ký: Cét thÐp kh«ng gØ (10 ®Õn 12,5 cm ´ 4,6 ®Õn 5 mm) ®îc nhåi pha tÜnh C (5mm) (cét ODS Hypersil lµ thÝch hîp).
Detector
quang phæ hÊp thô tö ngo¹i ë bíc sãng 330 nm.
ThÓ tÝch tiªm: 20 ml.
Tèc ®é dßng: 1,5 ml/phót.
C¸ch
tiÕn hµnh: TiÕn hµnh s¾c ký víi dung dÞch ®èi chiÕu, trªn s¾c ký ®å thu ®îc, thêi
gian lu cña thµnh phÇn C2 tõ 10 ®Õn 20 phót vµ c¸c pic ®îc t¸ch
hoµn toµn víi c¸c thêi gian lu t¬ng ®èi (so víi thµnh phÇn C2:
1,00) nh sau: Thuèc thö: 0,13; thµnh phÇn C1: 0,27; thµnh phÇn C1a:
0,65; thµnh phÇn C2a: 0,85;
§iÒu chØnh ®é nh¹y vµ thÓ tÝch
tiªm cña dung dÞch ®èi chiÕu ®Ó chiÒu cao cña pic ®èi víi thµnh phÇn C1
kho¶ng 75% cña thang ®o. KÎ mét ®êng ngang trªn s¾c ký ®å, nèi ch©n c¸c pic,
®o chiÒu cao cña mçi pic.
Còng tiÕn hµnh nh vËy víi
dung dÞch thö. PhÐp thö chØ cã gi¸ trÞ khi hÖ sè ph©n gi¶i gi÷a c¸c pic cña
thµnh phÇn C2a vµ C2 kh«ng nhá h¬n 1,3.
Tõ chiÒu cao cña c¸c pic trªn
s¾c ký ®å cña dung dÞch thö, dung dÞch ®èi chiÕu vµ c¸c tû lÖ thµnh phÇn t¬ng
øng ®· biÕt trong dung dÞch ®èi chiÕu, tÝnh ®îc tû lÖ c¸c thµnh phÇn C1,
C1a, C2a, C2 trong chÕ phÈm ®em thö.
C¸c tû lÖ ph¶i n»m trong giíi
h¹n sau:
C1: 25,0 – 50,0%.
C1a: 10,0 – 35,0%.
C2 + C2a:
25,0 – 55,0%.
TiÕn hµnh theo chuyªn luËn
“PhÐp thö néi ®éc tè vi khuÈn” (Phô lôc
13.2).
Pha lo·ng dung dÞch tiªm nÕu
cÇn thiÕt víi níc BET ®Ó cã nång ®é t¬ng ®¬ng kho¶ng 10 mg gentamicin/ ml
(Dung dÞch A). Giíi h¹n nång ®é néi ®éc tè vi khuÈn cña dung dÞch A lµ 16,7 IU
trong 1 ml. TiÕn hµnh phÐp thö sö dông gi¸ trÞ pha lo·ng cùc ®¹i cña dung dÞch
A ®îc tÝnh tõ ®é nh¹y cña thuèc thö Lysat dïng trong phÐp thö.
§Þnh
lîng
TiÕn hµnh theo chuyªn luËn
“X¸c ®Þnh ho¹t lùc thuèc kh¸ng sinh b»ng ph¬ng ph¸p thö vi sinh vËt” (Phô lôc
13.9).
Ho¹t lùc lý thuyÕt cña
gentamycin lµ 1000 ®¬n vÞ (IU) trong 1 mg.
Lo¹i thuèc
Kh¸ng sinh
80 mg/2 ml;
40 mg/1 ml vµ 40 mg/2 ml.